Método de Hibridación usados para Enfermedades Cerebrovasculares

Método de Southern Blot

Desarrollado por E. M. Southern para la detección de genes específicos en el ADN celular. El ADN es digerido con una enzima de restricción y los fragmentos son separados por tamaños mediante una electroforesis en un gel. Se realiza tinción con bromuro de etidio. A continuación los fragmentos de ADN de doble cadena son parcialmente hidrolizados con un ácido débil y desnaturalizados con NaOH para permitir la transferencia. Posteriormente, el ADN es transferido a un filtro de nitrocelulosa. A continuación el filtro se incuba durante un tiempo con la sonda marcada, durante la incubación la sonda se va hibridando a las moléculas de ADN de cadena sencilla de secuencia complementaria. La sonda unida al fragmento de ADN complementario se visualiza en el filtro de una forma sencilla mediante una exposición a una película de rayos X. 

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                           Técnica de Southern Blot completa: imagen